STC-1小鼠小腸內分泌細胞

產品編號：CL-001m

細胞特性

含量：>1x10⁶cells；

生長特性：貼壁生長；

細胞形態(tài)：上皮細胞樣，不規(guī)則形，圓形；

規(guī)格：T25瓶或者2mL凍存管包裝；

用途：僅供科研使用。

細胞運輸、保存及注意事項

培養(yǎng)條件

細胞復蘇、傳代、凍存操作

（一）細胞復蘇

①　凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速沒入 37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以 1 分鐘內全部溶解為宜；

②　在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內，1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘，棄去上清液，用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細胞；

③　然后將細胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中，放入（37℃，5%CO₂）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

注意：建議復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。

（二）細胞傳代

①　將舊培養(yǎng)液吸除，PBS 清洗兩遍后，加入 1-2mL 胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；

②　鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶，加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

③　將細胞懸液按 1:2 比例分到新的 T25 瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

④　注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細胞密度，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%-90%時，重復傳代操作或者凍存。

注意事項：細胞具有密度依賴性，首次傳代（密度達到 80%），建議 1:2 傳代（保持細胞密度），且優(yōu)先在 T25 瓶中。密封培養(yǎng)瓶的話，處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松。該細胞比較特殊，用 DMEM 培養(yǎng)產黑色素多點，用于藥物誘導試驗明顯。

（三）細胞凍存:

凍存則用3mL凍存液（50%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為3支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存。

注意事項

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。