當前位置：
微信咨詢
EL-4-B5 小鼠胸腺淋巴瘤細胞
產品編號：CL-132m
細胞特性
⑴來源：小鼠 胸腺 淋巴瘤細胞
⑵形態(tài)：淋巴母細胞樣，半貼壁半懸浮培養(yǎng)
⑶含量：>1x10?cells
⑷規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
⑸用途：僅供科研使用
細胞運輸、保存及注意事項
復蘇細胞 | 凍存細胞 | |
包裝 | 充液的T25細胞培養(yǎng)瓶 | 1mL凍存管 |
運輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉入液氮/立即復蘇 |
注意事項 | ① 收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們； ② 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照，10X和20X各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)； ③ 半貼細胞或貼壁不牢（懸?。┘毎?/span>T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代，傳代時需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細胞離心后回收； ④ 運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶 1：2傳代。 | |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備
完全培養(yǎng)基 | 1640培養(yǎng)基+優(yōu)質胎牛血清10 %+P/S青霉素-鏈霉素 1% |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%；溫度：37℃；培養(yǎng)箱濕度為70%-80% |
凍存液 | 90%血清 + 10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配 |
注意事項 | 該細胞是一種混合生長的細胞；細胞既可以以輕度附著的單層形式生長，也可以以懸浮液形式生長?？梢酝ㄟ^添加新鮮培養(yǎng)基來維持培養(yǎng)?；蛘?，可以通過將貼壁細胞用細胞刮鏟刮入含有漂浮細胞的培養(yǎng)基中，通過離心收集細胞，將細胞沉淀重懸于新鮮培養(yǎng)基中并分配到新的培養(yǎng)瓶中來對細胞進行傳代。建議收貨后的第一次傳代密度為1:2進行。后續(xù)的傳代可根據(jù)實際情況按1:2 1:4的比例進行。 |
細胞復蘇、傳代、凍存操作
（一）凍存細胞的復蘇
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4~6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻，1000rpm/min離心3~5min，棄去上清液。加入1mL完全培養(yǎng)基重懸細胞后，均勻鋪于含6~8mL完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中，置于37℃恒溫細胞培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況。
注意：建議復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩，避免凍存管處于溫差較大情況下發(fā)生爆炸造成人員傷害。
（二）細胞傳代（建議以同等底面積的培養(yǎng)瓶/皿按照1：2比例傳代）
① 待細胞密度達到70%~90%時，即可進行傳代培養(yǎng)。
② 該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，該細胞用細胞刮鏟替代胰酶來對細胞進行處理。用無菌細胞刮鏟刮拭細胞附著培養(yǎng)表面將細胞刮落，收集細胞后離心去上清，重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶內。收貨后第一次傳代1:2進行，后續(xù)可以根據(jù)實際的情況以1:2~1:4的比例進行傳代
（三）細胞凍存
① 細胞凍存時，步驟同細胞傳代的①~④，細胞計數(shù)后，加入配制好的細胞凍存液，重懸細胞，按照1×106 ~ 1×107個細胞/mL分配到一個凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
② 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80℃冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
注意事項：
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
鄂公網(wǎng)安備 42018502005592號
暫無評價信息！